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猴头菇菌种作育基制作进度

母种培养基配制一般以1000毫升为单位计算,1000毫升可分装18×180毫米试管100~120只,也可以按照灭菌锅灭菌数量或生产数量计算。按配方比例称取各种营养成分。把洗净的马铃薯削皮并去掉芽眼,切成条状或块状,放于锅中加水至需要量,煮沸半小时,待马铃薯块软而不烂,用4~6层纱布过滤,去掉滤渣,将滤液加水补充至用量,再加琼脂继续加热至完全溶化,再加入其他营养物质,搅拌溶化后,分装试管。一般装量为试管容量的1/5~1/4,塞上棉塞,棉塞要松紧适度,然后7支或10支为1捆,棉塞部位用牛皮纸包裹,以防打湿棉塞,最后进行高压蒸汽灭菌。

我们熟悉的猴头菇其实是一种腐生菌,因其丰富的营养价值被人们喜爱。现在,常采用人工培育猴头菇的方法,那么菌种就是必不可少的,菌种的形成离不开培养基的制作,下面我们来看看具体有哪些步骤。

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(1)母种生产常用材料

主要有马铃薯、葡萄糖、琼脂和水。

①马铃薯:提供食用菌菌丝生长所需的全面营养,选用无变绿、无发芽、无霉烂、无病斑的新鲜马铃薯。

②葡萄糖:提供可溶性碳源,使用化学纯制品,产品符合国家相关标准。

③琼脂:作为凝固剂,应从医药商店购买,产品符合国家相关标准。

④水:提供菌丝赖以健康生长发育的水分,通常使用洁净的自来水。

(2)母种培养基配方常用以下3种配方:

配方一:PDA培养基。马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1 000毫升,pH自然。

配方二:马铃薯综合培养基。马铃薯200克,葡萄糖20克, 磷酸二氢钾2克,硫酸镁1.5克,琼脂20克,水1 000毫升, pH自然。

配方三:猴头菇子实体培养基。猴头菇子实体200克,琼脂20克,水1 000毫升,pH自然。

因培养基种类较多,其他培养基配方这里不一一列入。

(3)母种培养基制作

①培养液制备:

PDA培养基:马铃薯去皮后称取200克,洗净,切成1毫米的厚小片或1厘米2的小块,加适量水煮沸20~30分钟,以马铃薯发白、变软、用筷子可捅出洞但不碎裂为度,不可煮太烂,否则培养液浑浊不清。用双层纱布过滤后取清液,得马铃薯汁。加入20克琼脂并加水至1 000毫升,再煮到琼脂融化,加入葡萄糖(若配制马铃薯综合培养基,同时加入磷酸二氢钾和硫酸镁),边加边搅拌,并注意补水至1 000毫升。

猴头菇子实体培养基:将猴头菇子实体清洗后切成薄片,放人1 000毫升水中,煮沸10分钟,用双层纱布过滤,取其汁, 加入琼脂至溶化,补足水。

②分装试管:培养基配制完毕应趁热及时分装,否则温度降低,琼脂凝固后还需要再加热融化。分装前要安装好分装装置, 常用玻璃漏斗套接乳胶管和尖嘴玻璃接液管,乳胶管上配止流夹。生产数量较多时也可用医用的灌肠杯代替漏斗。猴头菇母种生产所用的试管最好是20毫米×200毫米规格的,分装时左手抓握4~5支试管,右手控制接液管插入试管,逐一注入培养基, 试管中的培养基量为总试管容量的1/5~1/4。分装时应注意不要将培养液沾到试管口,避免将来发生污染。若有沾液,则要用灭菌纱布及时擦净。分装的试管培养基凝固后,直接加棉塞封口。要用普通棉花,不能用脱脂棉。塞棉塞时要注意做到大小适宜、松紧适度、操作方便,不宜过松或过紧,以封口后手持棉塞轻轻摇动时试管不脱落且旋转拔出顺利为度;棉塞外观要求光滑,不能塞得过浅或过深,否则会造成操作困难。

③高压灭菌:分装好的试管应当及时灭菌。灭菌时将试管扎成捆,一般7支为一捆,用橡皮筋扎紧,然后用牛皮纸或其他防潮纸将整捆试管的棉塞包好,直接放人手提式高压灭菌锅内的灭菌桶中,装量不宜过多,应留1/5的空间,以利于灭菌时气体的流动。将桶放入加有适量水的手提高压锅中,正确封盖。封盖后开始加热,加热到压强为o.05兆帕时,打开放气阀排气,直至排净锅内的空气,压力表指针回零。排气后关闭放气阀,加热升温到压强为0- 11No.12兆帕,此时锅内的温度为121℃以上, 保压灭菌30分钟。灭菌30分钟后,自然降压直至压力表指针回零,打开锅盖。开盖时注意先错开一条小缝,让蒸汽冒出并带走棉塞上的水分,起到干燥棉塞的作用。

④摆成斜面:开盖后趁热取出试管,斜卧放置,使之自然冷却凝固成斜面,即成斜面培养基。斜面为试管长的1/3~1/2为宜。摆斜面后将试管保温,使试管缓慢凝固,以减少试管内外温差,从而减少试管内的冷凝水。

猴头菇菌种培养基制作过程较为复杂,母种生产常用材料马铃薯、葡萄糖、琼脂和水,材料的挑选也是关键,所以我们要仔细细心。母种培养基制作首先要进行培养液制备,再分装试管,然后高压灭菌最后摆成斜面即可。

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